Biểu hiện gen HIV-1 p24 ở cây thuốc lá chuyển gen lục lạp

Tóm tắt

Chuyển gen HIV-1 p24 vào lục lạp đã được thực hiện thành công ở cây thuốc lá V2 (Virginia TBE2). Bằng các kỹ thuật PCR và Southern blot, các gen chuyển được chứng minh đã hòa nhập vào đúng vị trí thiết kế trên lục lạp, giữa gen trnfM và trnG. Kết quả Western blot cho thấy gen HIV-1 p24 biểu hiện ở các dòng thuốc lá chuyển gen. Hàm lượng protein p24 được ghi nhận qua phân tích ELISA cho thấy tích lũy ở mức cao nhất là 6,3 % tổng protein hòa tan (total soluble protein - TSP), ở các lá gần ngọn, và thấp nhất là 1,7% TSP. Protein được tinh sạch bằng phương pháp sắc ký lọc gel phân tử có độ tinh sạch là 9,694 lần, hiệu suất tinh sạch là 31,94%, tuy nhiên protein p24 mất hoạt tính nhiều sau khi tinh sạch.