Ảnh hưởng của một số điều kiện đến việc ổn định hoạt tính laccase trong bào tử Bacillus subtilis và khảo sát khả năng khử màu thuốc nhuộm azo của laccase

Tóm tắt

Laccase là một polyphenol oxidase và việc ổn định hoạt tính của enzyme này thường gặp nhiều khó khăn. Vì vậy, việc tìm ra phương pháp ổn định hoạt tính laccase có ý nghĩa thực tiễn. Chủng Bacillus subtilis được nuôi cấy trong môi trường tạo bào tử, và thời gian cũng như phương pháp thu nhận bào tử được khảo sát để tạo ra mẫu chế phẩm có hoạt tính laccase cao nhất. Hoạt tính laccase từ mẫu B.subtilis sau 04 ngày nuôi cấy đã tăng 14.53 lần so với ngày đầu tiên. Sinh khối chứa bào tử được xử lý với NaCl và CuSO4 để tạo mẫu chế phẩm có hoạt tính laccase. Sau khi xử lý, mẫu chế phẩm được bảo quản trong CuSO4 để khảo sát tính ổn định của laccase. Trong các nồng độ khảo sát, nồng độ CuSO4 0.25mM cho hoạt tính laccase cao nhất (39 U/g), tăng 2.38 lần sau 06 tuần bảo quản. Về nhiệt độ bảo quản, mẫu chế phẩm bảo quản ở 4oC có độ tăng hoạt tính cao nhất (tăng 2.9 lần) và ổn định nhất so với mẫu bảo quản ở -4oC (tăng 1.19 lần) và 37oC (tăng 2.02 lần). Đối với thời gian bảo quản, mẫu chế phẩm bảo quản trong CuSO4 0.25mM ở 4oC sau 12 tuần vẫn duy trì hoạt tính laccase ổn định và tăng 2.64 lần (39.42 U/g) so với mẫu ban đầu. Sau 09 tuần, hoạt tính laccase đạt mức tăng cao nhất, tăng 3.44 lần (51.33 U/g). Mẫu chế phẩm bảo quản trong CuSO4 0.25mM sau 04, 08 và 12 tuần đạt hiệu suất khử màu lần lượt là 46.75%, 65.02% và 70.89%. Kết quả cho thấy có mối tương quan thuận giữa hoạt tính laccase và khả năng khử màu Congo red của mẫu chế phẩm.