Nuôi cấy ex vivo tế bào T CD4+ và T CD8+ phân lập từ tế bào đơn nhân máu ngoại vi người

Tóm tắt

Miễn dịch trị liệu hiện đang là phương pháp hấp dẫn trong điều trị bệnh ung thư. Các tế bào miễn dịch được phân lập, kích hoạt, tăng sinh ex vivo, và can thiệp về chức năng để sau đó truyền trở lại người bệnh. Ở nghiên cứu này, chúng tôi phân lập tế bào T CD4⁺ và T CD8⁺ từ tế bào đơn nhân máu ngoại vi người (PBMC), kích hoạt và nuôi cấy ex vivo hai quần thể tế bào này trong điều kiện sử dụng hạt từ phủ kháng thể CD3/CD28 ở tỉ lệ 01 hạt từ: 01 tế bào, bổ sung 30 U/mL IL-2 trong môi trường nuôi cấy. Số lượng tế bào được kiểm tra mỗi ngày bằng thuốc nhuộm Trypan Blue, tỉ lệ quần thể tế bào CD3⁺CD4⁺ và CD3⁺CD8⁺ được kiểm tra bằng phương pháp phân tích tế bào theo dòng chảy flow cytometry. Kết quả sau 10 ngày nuôi cho thấy, quần thể tế bào T CD4⁺ có sự tăng mạnh số lượng tế bào, tăng hơn 30 lần so với ngày đầu, đạt 6.5 x 10⁷ tế bào. Đối với tế bào T CD8⁺ cũng ghi nhận có sự tăng nhưng không đáng kể số lượng tế bào sau 10 ngày nuôi, đạt 3 x 10⁶ tế bào. Kết quả flow cytometry cho thấy quần thể tế bào T CD4⁺ vẫn duy trì được tỉ lệ CD3⁺/CD4⁺ hơn 90% ở ngày quan sát thứ 04, trong khi đó, quần thể T CD8⁺ có sự tăng số tế bào tuy nhiên tỉ lệ CD3⁺/CD8⁺ chỉ đạt hơn 40% trong quần thể. Như vậy, nhóm nghiên cứu đã có thể phân lập và nuôi cấy thành công ex vivo tế bào T CD4⁺ và T CD8⁺.