BIỂU HIỆN GEN VÀ THU NHẬN ENZYME MALTOGENIC AMYLASE TÁI TỔ HỢP TỪ ESCHERICHIA COLI BL21 (DE3) CHO ỨNG DỤNG TRONG CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM
Tóm tắt
Công nghệ DNA tái tổ hợp có nhiều ứng dụng quan trọng trong ngành công nghiệp thực phẩm, đặc biệt là trong sản xuất enzyme. Enzyme maltogenic amylase ứng dụng trong sản xuất maltose, cải thiện chất lượng bánh mì và xử lý tinh bột. Gen MT được xác định trình tự từ GenBank, mã hóa cho enzyme maltogenic amylase. Tách dòng gen MT từ chủng vi khuẩn probiotic Bacillus subtilis MHN21, chèn vào vector biểu hiện và biểu hiện trên chủng vi khuẩn Escherichia coli BL21 (DE3). Kết quả khảo sát các thông số trong quá trình biểu hiện gen cho thấy ở nhiệt độ 37oC, nồng độ chất cảm ứng IPTG (isopropyl β-D-1- thiogalactopyranoside) 1,5 mM, thời gian biểu hiện 4 giờ là điều kiện tối ưu cho sự biểu hiện enzyme. Đánh giá hoạt tính enzyme thô cho thấy enzyme thu được có hoạt độ 103,25 U/mg ở 55oC, pH=7. Quy trình biểu hiện gen và thu nhận enzyme maltogenic amylase tái tổ hợp có tính khả thi và mở ra tiềm năng ứng dụng trong công nghiệp thực phẩm.