Nhân dòng và phân tích trình tự gen mã hoá dị nguyên Der f 1 từ mạt bụi nhà Dermatophagoides farinae trong Escherichia coli

Tóm tắt

Kháng nguyên Der f 1 của Dermatophagoides farinae (D. farinae) là một trong những tác nhân chính gây dị ứng mạt bụi nhà. Mục tiêu của nghiên cứu là tách dòng gen mã hóa kháng nguyên Der f 1 từ D. farinae được thu thập tại Việt Nam làm cơ sở cho việc phát triển protein Der f 1 tái tổ hợp. Sản phẩm khuếch đại toàn bộ trình tự mã hóa cho Der f 1 (thực hiện bằng phản ứng PCR 3 bước, sử dụng cDNA tổng hợp từ RNA của D. farinae) được nhân dòng trong vector pGEM-T và biến nạp vào vi khuẩn Escherichia coli DH5α. Plasmid tái tổ hợp được sàng lọc bằng PCR khuẩn lạc và giải trình tự theo phương pháp Sanger. Trình tự gen Der f 1 và amino acid suy diễn tương ứng có độ tương đồng 99% so với các trình tự nucleotide và amino acid tham chiếu trên GenBank (mã số lần lượt là AB034946.1 và ABL84751.1). Trình tự gen Der f 1 từ D. farinae thu thập tại Việt Nam đã được đăng ký trên GenBank với mã số PP417680.1. Kết quả nghiên cứu cung cấp dữ liệu nền tảng quan trọng cho các nghiên cứu về protein Der f 1 tái tổ hợp, phục vụ cho chẩn đoán và điều trị dị ứng mạt bụi nhà bằng liệu pháp miễn dịch đặc hiệu tại Việt Nam.