Xây dựng mô hình in vitro mô phỏng tình trạng tổn thương tế bào gan do acid béo gây ra trên dòng tế bào gan người HepG2

Tóm tắt

Rối loạn lipid huyết là bệnh lý phổ biến, gây ảnh hưởng xấu đến sức khỏe. Tăng lipid máu (tăng triglycerid, tăng cholesterol hoặc cả hai) được phát hiện ở 20 % đến 81 % bệnh nhân gan nhiễm mỡ hoặc xơ gan không do rượu. Xu hướng hiện nay là sử dụng thuốc bảo vệ gan nguồn gốc thảo dược vì có thể sử dụng lâu dài và tính an toàn cao. Tuy nhiên, Việt Nam chưa khai thác hiệu quả nguồn dược liệu phong phú và đa dạng vì thiếu mô hình sàng lọc ổn định, tin cậy, có thể thực hiện nhanh chóng. Mô hình in vitro trên dòng tế bào HepG2 thường được sử dụng sàng lọc chất/dược liệu có khả năng làm thuốc với ưu điểm thời gian ngắn, ít tốn kém, lượng chất thử cần dùng ít, có thể tiến hành với số lượng mẫu lớn. Từ đó, đề tài này được thực hiện nhằm xây dựng mô hình trên dòng tế bào gan HepG2 với acid béo mô phỏng tình trạng tổn thương tế bào gan thường gặp ở bệnh nhân rối loạn lipid huyết ứng dụng sàng lọc chất/dược liệu có khả năng làm thuốc phòng và điều trị tổn thương này.

Phương pháp nghiên cứu

- Nuôi cấy và xử lý tế bào.

- Đánh giá tỉ lệ tế bào sống bằng test MTT.

- Đánh giá tình trạng tích lũy lipid bằng phương pháp nhuộm dầu đỏ O.

- Định lượng glutathion (GSH) nội bào.

- Đánh giá tình trạng hoại tử tế bào gan.

- Đánh giá quá trình apoptosis.

- Phân tích và xử lý thống kê.

Kết luận

            Đề tài đã xây dựng mô hình in vitro trên tế bào HepG2 nuôi cấy ở mật độ 4,2 x 10⁴ tế bào/cm², được xử lý với hỗn hợp acid béo 2 mM (tỷ lệ acid oleic/acid palmitic: 2/1) trong 24 giờ mô phỏng tình trạng tổn thương tế bào gan, ứng dụng trong sàng lọc các chất/dược liệu có khả năng làm thuốc phòng và/hoặc điều trị bệnh gan trên bệnh nhân rối loạn lipid huyết.