Nghiên cứu định tính, định lượng tetrodotoxin trong bột đông khô tetrodotoxin 0,1 % bằng phương pháp sắc ký lỏng khối phổ (LC-MS/MS)

Abstract

 Tetrodotoxin (TTX) là độc tố thần kinh có hoạt lực cao và có giá trị lớn trong y họcNhiều tác giả trong và ngoài nước đã nghiên cứu và sử dụng TTX giảm đau trong ung thư, điều trị cai nghiện đem lại kết quả tốt. Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương đã tiến hành chiết xuất TTX thô hàm lượng ≥ 80 % từ phủ tạng một số loài cá nóc tại vùng biển Việt Nam. Từ TTX thô bào chế thành bột đông khô TTX 0,1 % nhằm mục đích sử dụng trong nghiên cứu y học, bào chế thuốc có chứa TTX ở quy mô công nghiệp. Do đó, bột đông khô TTX 0,1 % được bào chế cần được tiêu chuẩn hóa, xây dựng phương pháp phân tích. Nghiên cứu này lựa chọn phương pháp LC-MS/MS để định tính, định lượng TTX trong bột đông khô TTX 0,1 % do nhiều ưu điểm vượt trội là độ đặc hiệu cao, độ nhạy tốt.

Phương pháp nghiên cứu

- Mẫu dùng trong nghiên cứu: Mẫu bột đông khô TTX 0,1%, lô sản xuất: TTX.BND.01, sản xuất bởi Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương. Mẫu placebo: Bột đông khô chứa tá dược giống mẫu bột đông khô TTX 0,1% nhưng không chứa TTX.

- Chuẩn bị mẫu: Dãy dung dịch chuẩn, dung dịch thử (A), dung dịch mẫu placebo (B), dung dịch thêm chuẩn (C, D, E).

- Thẩm định phương pháp: Thẩm định phương pháp với các chỉ tiêu: tính hích hợp hệ thống, độ đặc hiệu, độ lặp lại, khoảng tuyến tính, độ đúng, giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng.

            Kết luận

            Đã xây dựng được phương pháp định tính, định lượng TTX cho bột đông khô TTX 0,1 % bằng sắc ký lỏng khối phổ LC-MS/MS có khoảng tuyến tính nồng độ từ 0,5 - 10,0 µg/ml, có độ đặc hiệu và độ đúng đạt yêu cầu phân tích với giới hạn phát hiện LOD = 10 ng/ml, giới hạn định lượng LOQ = 30 ng/ml. Bột đông khô tetrodotoxin có hàm lượng 0,103 % tính trên sản phẩm nguyên trạng.