Đánh giá hoạt tính theo hướng ức chế miễn dịch in vitro và in vivo của auronol glucosid alphitonin-4-O-β-D glucopyranosid

Tóm tắt

Lá cây chay Bắc Bộ (Artocarpus tonkinensis A. Chev.) đã được sử dụng trong dân gian chữa bệnh tê thấp, đau lưng và nhược cơ. Từ năm 1994, dịch chiết từ lá cây chay đã được Bệnh viện Quân y 108 nghiên cứu ứng dụng trong điều trị bệnh nhược cơ (myasthenia gravis). Từ thực tiễn trên, nhóm nghiên cứu của Viện KH&CN Việt Nam đã kiểm tra hoạt tính sinh học các phân đoạn chiết và phân lập các hợp chất từ lá cây chay theo định hướng ức chế miễn dịch. Hợp chất alphitonin-4-O-β-D-glucopyranosid và maesopsin-4-O-β-D-glucopyranosid là hai auronol glucosid được nhóm phân lập từ dịch chiết butanol của lá cây chay Bắc Bộ. Kết quả nghiên cứu sơ bộ trên khả năng ức chế chuyển dạng tế bào lympho đã thể hiện cả hai có hoạt tính ức chế miễn dịch khá tốt. Tuy nhiên, các hợp chất auronol và cả auronol glucosid là nhóm chất hiếm gặp và có hàm lượng thấp trong tự nhiên nên việc tổng hợp hoạt chất alphitonin-4-O-β-D-glucopyranosid đã lần đầu tiên được thực hiện bởi nhóm nghiên cứu Viện Hóa sinh biển. Nghiên cứu này nhằm xác định khả năng ức chế miễn dịch của chất tổng hợp được.

Nguyên liệu:

Alphitonin-4-O-b-D-glucopyranosid (AG6) do nhóm nghiên cứu - Viện Hóa sinh biển tổng hợp. Chất thử được pha trong dimethylsulphosid (DMSO).

Phương pháp nghiên cứu

- Phương pháp nuôi cấy tế bào và xử lý mẫu: Tế bào macrophages dòng RAW 264.7 được nuôi cấy trong môi trường nuôi cấy DMEM, bổ sung 10% fetal bovine serum - FBS (GIBCO) và nuôi trong tủ ấm CO₂ ở điều kiện 37^oC, 5% CO₂.

- Phương pháp xác định interleukin: Xác định interleukin theo hướng dẫn của ELISA Kit (Biovision).

- Phương pháp đánh giá tác dụng thu teo tuyến ức: Đánh giá tác dụng ức chế miễn dịch của alphitonin-4-O-β-D-glucopyranosid thông qua ảnh hưởng lên tuyến ức.

- Xử lý số liệu thống kê: Kết quả nghiên cứu in vitro được biểu diễn dưới dạng M ± SD (M: giá trị trung bình từng mẫu, SD: độ lệch chuẩn).

Kết quả

In vitro, alphitonin-4-O-b-D-glucopyranosid ở nồng độ 1000 µg/ml đã ức chế tế bào macrophage sinh IL-2 và ở nồng độ 500 µg/ml đã kích thích tế bào macrophage sinh IL-4 so với đối chứng LPS.

In vivo, alphitonin-4-O-b-D-glucopyranosid với liều 400 mg/kg có tác dụng thu teo tuyến ức, làm giảm khối lượng tuyến ức chuột cống non thực nghiệm, tỷ lệ % giảm khối lượng tuyến ức là 18,8 % so với lô chứng.