XÂY DỰNG VECTOR BIỂU HIỆN OseIF4AIIa-GFP VÀ TẠO DÒNG Agrobacterium tumefaciens TÁI TỔ HỢP PHỤC VỤ NGHIÊN CỨU CHỨC NĂNG GEN TRONG CÂY LÚA
Từ khóa
DOI:
https://doi.org/10.34238/tnu-jst.13259Tóm tắt
Nghiên cứu này nhằm phân lập và thiết kế vector biểu hiện mang gen OseIF4AIIa của cây lúa (Oryza sativa) để phục vụ các phân tích chức năng tiếp theo, trong bối cảnh gen này được giả định mã hóa một DEAD-box RNA helicase có liên quan đến cơ chế đáp ứng của thực vật với điều kiện môi trường bất lợi. Trình tự mã hóa của OseIF4AIIa được khuếch đại từ cDNA bằng phản ứng chuỗi polymerase, cho sản phẩm có kích thước 1.261 bp. Sản phẩm khuếch đại được tinh sạch, gắn vào vector tách dòng yT&A, sau đó chuyển tiếp vào vector nhị phân pMDC85 để tạo cấu trúc biểu hiện dung hợp huỳnh quang pMDC85-OseIF4AIIa-GFP. Vector tái tổ hợp được biến nạp thành công vào chủng Agrobacterium tumefaciens bằng phương pháp xung điện và xác nhận bằng phản ứng chuỗi polymerase. Toàn bộ quy trình từ phân lập gen đến thiết kế vector biểu hiện được thực hiện hiệu quả, tạo ra dòng vi khuẩn tái tổ hợp mang cấu trúc gen đích. Nghiên cứu cung cấp cơ sở kỹ thuật quan trọng cho các thí nghiệm chuyển gen tiếp theo nhằm phục vụ phân tích chức năng của OseIF4AIIa trong cây lúa.Lượt tải
Tài liệu tham khảo
T. Fairhurst and A. Dobermann, "Rice in the global food supply," World, vol. 5, no. 7502, pp. 454349-511675, 2002.
B. L. Gross and Z. Zhao, "Archaeological and genetic insights into the origins of domesticated rice," Proceedings of the National Academy of Sciences, vol. 111, no. 17, pp. 6190-6197, 2014.
L. Nkurunziza et al., "Socio-ecological factors determine crop performance in agricultural systems," Scientific Reports, vol. 10, no. 1, 2020, Art. no. 4232.
R. K. Sahoo, V. Rani, and N. Tuteja, "Azotobacter vinelandii helps to combat chromium stress in rice by maintaining antioxidant machinery," 3 Biotech, vol. 11, no. 6, 2021, Art. no. 275.
S. Kumar, "Abiotic stresses and their effects on plant growth, yield, and nutritional quality of agricultural produce," International Journal of Food Science and Agriculture, vol. 4, no. 4, pp. 367-378, 2020.
H. Shi, S. He, X. He, S. Lu, and Z. Gou, "An eukaryotic elongation factor 2 from Medicago falcata (MfEF2) confers cold tolerance," BMC Plant Biology, vol. 19, 2019, Art. no. 218.
C. A. Lu, C. K. Huang, W. S. Huang, T. S. Liu, and Y. F. Chen, "DEAD-box RNA helicase 42 plays a critical role in pre-mRNA splicing under cold stress," Plant Physiology, vol. 182, no. 1, pp. 255-271, 2020.
G. W. Owttrim, "RNA helicases and abiotic stress," Nucleic Acids Research, vol. 34, no. 11, pp. 3220-3230, 2006.
P. Umate, R. Tuteja, and N. Tuteja, "Genome-wide analysis of helicase gene family from rice and Arabidopsis: a comparison with yeast and human," Plant Molecular Biology, vol. 73, no. 4, pp. 449-465, 2010.
O. Cordin, J. Banroques, and N. K. P. Linder, "The DEAD-box protein family of RNA helicases," Gene, vol. 367, pp. 17-37, 2006.
A. K. Byrd and K. D. Raney, "Superfamily 2 helicases," Frontiers in Bioscience (Landmark Edition), vol. 17, pp. 2070-2088, 2012.
X. Li, C. Li, J. Zhu, S. Zhong, H. Zhu, and X. Zhang, "Functions and mechanisms of RNA helicases in plants," Journal of Experimental Botany, vol. 74, no. 7, pp. 2295-2310, 2023.
