TẠO ENZYME NUCLEASE CÓ KHẢ NĂNG NHẬN DIỆN CẤU TRÚC G-QUADRUPLEX SONG SONG VÀ CẮT DNA TẠI VỊ TRÍ ĐẶC HIỆU

Tóm tắt

G-quadruplex là cấu trúc bậc 2 của DNA hay RNA mà đóng vai trò quan trọng trong các quá trình sinh học như sao chép, phiên mã, dịch mã và kéo dài các telomeres. Do đó, cấu trúc G-quadruplex được xem như một phân tử mục tiêu trong việc thiết kế các thuốc trúng đích ứng dụng trong y sinh. Trong nghiên cứu này, nuclease mới được phát triển có khả năng nhắm mục tiêu G-quadruplex song song và thực hiện chức năng cắt tại vị trí đặc hiệu. Enzyme mới được tạo ra bằng phương pháp kết hợp phân tử peptit RHAU53 có khả năng nhận diện G-quadruplex song song với vùng protein xúc tác cắt của Fok1, tạo nên protein dung hợp RHAU53-Fok1. Protein dung hợp này có thể được biểu hiện trong hệ thống E. coli dưới sự cảm ứng của IPTG và được tinh chế bằng sắc ký ái lực với cột His. Đặc biệt, RHAU53-Fok1 có thể nhận diện và bám đặc hiệu vào cấu trúc G-quadruplex song song và cắt DNA sợi kép bên cạnh cấu trúc đó. Enzyme cắt DNA ở nhiều vị trí cho ra 1 sản phẩm chính và các sản phẩm phụ. Enzyme mới này được xem là công cụ tiềm năng cho việc lập bản đồ vị trí cấu trúc G-quadruplex trong bộ gen.