Khảo sát sự biến nạp gen ở mô sẹo mía (Saccharum Officinarum L.) bằng vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens và tái sinh chồi sau chuyển gen

Tóm tắt

Mía (Saccharum officinarum L.) là một trong những cây trồng chủ đạo cho nhiều ngành công nghiệp trên thế giới. Việc tạo các giống mía chuyển gen góp phần khắc phục được các nhược điểm của phương pháp canh tác truyền thống. Khúc cắt thân non mía sau 10 ngày đặt trên môi trường MS (Murashige và Skoog) bổ sung 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) 3 mg/L cho tỉ lệ tạo sẹo cao nhất với tỉ lệ 91,11%. Sẹo mía được cảm ứng tạo chồi trên môi trường MS bổ sung 6- Benzyladenin (BA) với các nồng độ 0, 0,5, 1,0, 1,5, 2,0, 2,5 mg/L. Cả 6 nồng độ BA đều có khả năng tạo chồi, tuy nhiên nồng độ 1,0 mg/L là tốt nhất. Sẹo 4-5 tuần tuổi được tiến hành chuyển gen thông qua vi khuẩn Agrobacerium tumefaciens kết hợp với sự thay đổi các yếu tố nồng độ acetosyringone (AS), thời gian ủ mẫu với khuẩn và thời gian phơi khô mẫu. Trong đó, việc sử dụng nồng độ AS 100 μM và 150 μM đều có thể chuyển gen và tái sinh chồi thành công với tỉ lệ chuyển gen giả định là 25%.