Cấu trúc chủng nấm men Pichia pastoris biểu hiện mini-proinsulin dạng tiết ra môi trường nuôi cấy

Tóm tắt

Đái tháo đường là một trong những căn bệnh đang rất được quan tâm hiện nay. Nhằm mục đích sản xuất insulin tái tổ hợp phục vụ điều trị bệnh đái tháo đường, chúng tôi dòng hóa và biểu hiện miniproinsulin trong Pichia pastoris. Đoạn DNA mang gen mã hóa miniproinsulin-6xHis (MPI-6xHis) được dòng hóa vào vector pPICZαA tạo plasmid pPICZαA/h-mpi để cấu trúc chủng P. pastoris GS115::h-mpi biểu hiện MPI tái tổ hợp dạng tiết ra ngoài môi trường. Kiểu hình và kiểu gen của P. pastoris GS115::h-mpi được xác định bằng PCR và cắt hạn chế. MPI được biểu hiện ở dạng dung hợp với thể 6xHis khi cảm ứng với methanol với nồng độ cuối cùng 0,5% sau 96 giờ.