Tinh chế nhân tố tăng trưởng nguyên bào sợi người tái tổ hợp từ dịch lên men quy mô một lít

Tóm tắt

Nhân tố tăng trưởng nguyên bào sợi FGF-2, hay còn gọi là bFGF (basic Fibroblast Growth Factor) là một protein đa chức năng, tham gia điều hòa quá trình tăng sinh và biệt hóa của nhiều loại tế bào. Hiện nay, FGF-2 người tái tổ hợp (rhFGF-2) được ứng dụng trong nhiều lĩnh vực bao gồm y-dược, mỹ phẩm, nuôi cấy tế bào gốc…Trong nghiên cứu này chúng tôi tiến hành lên men chủng Escherichia coli mang vector tái tổ hợp chứa gen mã hóa protein FGF-2 ở qui mô một lít để thu nhận một lượng lớn protein FGF-2. Hiệu quả của quá trình lên men được đánh giá dựa trên đường cong tăng trưởng của chủng, lượng sinh khối khô cũng như lượng FGF-2 thu được từ một lít dịch lên men. Tế bào sau khi thu nhận được phá vỡ bằng áp suất cao. Sau đó, FGF-2 từ dịch đồng nhất tế bào được tinh sạch bằng sắc kí trao đổi cation và sắc kí ái lực với heparin. Độ tinh sạch và hiệu suất tinh chế FGF-2 được đánh giá bằng phương pháp đo Bradford, nhuộm bạc và phần mềm Quantity One. Kết quả thu được từ một lít dịch lên men cho thấy lượng sinh khối khô thu được khoảng 5,2 g/l, lượng FGF-2 đạt khoảng 230 mg/l. FGF-2 qua hai bước tinh chế đạt độ tinh sạch 97,1 % và hiệu suất thu hồi khoảng 46,08 %.