Biểu hiện và tinh sạch listeriolysin O của Listeria monocytogenes mang hai đột biến điểm E247M và D320K trong Bacillus subtilis

Tóm tắt

Listeriolysin O (LLO) từ Listeria monocytogenes có chức năng phân hủy màng phospholipid ở điều kiện pH thấp trong quá trình xâm nhiễm tế bào chủ. Yếu tố này có thể ứng dụng trong việc phân phối tác chất vào trong mô nếu như LLO hoạt động được ở điều kiện pH trung tính và không chứa độc tố trong quá trình thu nhận LLO. Nghiên cứu này nhằm biểu hiện LLO đột biến E247M và D320K trên hệ thống Bacillus subtilis nhằm thu nhận LLOE247M và D320K có hoạt tính ở điều kiện pH trung tính. Nhằm tăng cường khả năng biểu hiện protein trong B. subtilis và dễ dàng thu nhận bằng phương pháp tinh chế qua cột sắc kí chứa ion Ni²⁺, gen mã hóa protein LLOE247M và D320K được dung hợp với trình tự đuôi LysSRN-6xHis-TEVsite. Kết quả đã tinh chế được protein tái tổ hợp có độ tinh sạch cao và  có hoạt tính tán huyết với 3 HU độc tố trong khoảng pH từ 5,0 đến 8,5. Kết quả nghiên cứu này làm cơ sở cho các nghiên cứu ứng dụng tiếp theo.