Thu nhận hiệu quả beta-mannanase dung hợp với móc neo LysM3014 trong Escherichia coli bằng phương pháp phá vỡ tế bào với hạt thủy tinh

Tóm tắt

Hướng đến sự phát triển hệ thống xúc tác toàn tế bào theo phương thức không biến đổi gen, trong nghiên cứu này, ba phương pháp phá vỡ tế bào E. coli gồm: siêu âm, kết đông - rã đông và lắc với hạt thủy tinh được thực hiện để thu nhận hiệu quả enzyme lai LysM3014-ManB chứa beta-mannanase (ManB) từ Bacillus licheniformis dung hợp với một vùng LysM từ transglycosylase ngoại bào giả định Lp_3014 của Lactobacillus plantarum WCFS1. Kết quả cho thấy, hoạt tính xúc tác của beta-mannanase cao nhất (~46.651 U/l dịch lên men) đạt được khi tế bào được phá
vỡ bởi hạt thủy tinh. Ngoài ra, hoạt tính xúc tác của đoạn enzyme lai đã tăng lên 1,4 lần (~66.000 U/l dịch lên men) trong điều kiện phá vỡ tế bào bằng hạt thủy tinh sử dụng ống falcon có thể tích 50 ml với tỷ lệ hạt thủy tinh 1,0 g/ml và thời gian phá vỡ là 8 phút. Nghiên cứu này cho thấy, phá vỡ tế bào bằng hạt thủy tinh là phương pháp đơn giản và hiệu quả nhất so với các phương pháp còn lại. Enzyme lai có thể được sử dụng để tiếp tục nghiên cứu quá trình cố định ManB trên bề mặt tế bào L. plantarum thông qua móc neo chứa một vùng LysM.