Ảnh hưởng giai đoạn bổ sung yếu tố tăng trưởng nội mao mạch trong môi trường nuôi thành thục tế bào trứng đến sự thành thục nhân và phát triển của phôi đơn tính ở heo thu từ nang noãn nhỏ
Nguyễn Văn Ba, Giang Thị Thanh Nhàn, Nguyễn Thị Lệ Hương, Phạm Thu Thảo, Nguyễn Khánh Vân và Phạm Doãn Lân.
Tóm tắt
Mục tiêu của nghiên cứu này là đánh giá ảnh hưởng của thời điểm bổ sung yếu tố tăng trưởng
nội mao mạch (VEGF) trong môi trường nuôi cấy thành thục (IVM) đến tỷ lệ thành thục nhân và
phát triển phôi đơn tính từ nguồn tế bào trứng heo thu nhận từ nang noãn nhỏ. Phức hợp tế bào
trứng-cumulus (COC) có từ 2 lớp cumulus trở lên sau khi được thu nhận từ nang noãn nhỏ (SF)
được lựa chọn đưa vào nuôi cấy với các thời điểm bổ sung VEGF khác nhau trong IVM. Kết quả
cho thấy tỷ lệ thành thục về nhân của tế bào trứng thu từ MF cao hơn so SF khi không bổ sung
VEGF (74,6 và 45,4%; P<0,05). Ở các thời điểm bổ sung VEGF khác nhau, tỷ lệ thành thục về nhân
cao nhất khi bổ sung VEGF ở nhóm tế bào trứng thu từ SF trong 22 giờ đầu IVM (73,9%), tiếp đến
là 44 giờ (71,2%), sau đó là 22 giờ sau (58,5%) và được ghi nhận là thấp nhất khi không bổ sung
VEGF (45,4%). Đặc biệt, khi bổ sung VEGF ở nhóm tế bào trứng SF trong suốt 44 giờ và 22 giờ đầu
của IVM cho kết quả về tỷ lệ thành thục nhân không khác biệt có ý nghĩa so với nhóm tế bào trứng
thu từ MF khi không bổ sung VEGF (74,6%; P>0,05). Sau quá trình IVM, các tế bào trứng có xuất
hiện thể cực thứ nhất được kích hoạt phôi đơn tính bằng ethanol 7% kết hợp với 2,5µM 6-DMAP.
Tỷ lệ phân chia tế bào và hình thành phôi nang khi bổ sung VEGF trong giai đoạn suốt 44 giờ (lần
lượt là 70,7 và 24,4%) và 22 giờ đầu (lần lượt là 74,3 và 28,3%) của IVM ở nhóm tế bào trứng SF khác
biệt không có ý nghĩa so với nhóm tế bào trứng thu từ MF khi không bổ sung VEGF (79,9 và 31,7%;
P>0,05). Vì vậy, việc bổ sung VEGF ở nồng độ 250 ng/ml vào môi trường ở 22 giờ đầu hoặc suốt 44
giờ của IVM không những giúp cải thiện tỷ lệ thành thục nhân mà còn giúp nâng cao hiệu quả sản
xuất phôi đơn tính của tế bào trứng heo thu từ nang noãn nhỏ trong điều kiện in vitro.
